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知識講解:ELISA實驗設(shè)置陰性、陽性和空白對照的重要作用

更新時間:2024-07-25    點擊次數(shù):515

  知識講解:ELISA實驗設(shè)置陰性、陽性和空白對照的重要作用

 

  ELISA檢測,要求嚴(yán)格按照試劑說明書要求,每次試驗、每塊扳上都要設(shè)置以下3項對照和用途下面我司技術(shù)為您詳細介紹ELISA實驗設(shè)置陰性、陽性和空白對照的作用:

  1.空白對照:僅用稀釋液代替檢測樣本、用以觀測zui終反應(yīng)的顯色“本底"、并用于酶標(biāo)儀消除、扣除“本底",即:以本底為“零"讀取陽性、陰性對照孔和樣本檢測孔的吸光值(A);或者,在計算陰性對照均值(NCx)、陽性對照均值(PCx)、樣本讀數(shù)的S/C.O.值時減去空白對照的本底吸光值。

  2.陰性對照(品):所謂陰性對照(品),應(yīng)當(dāng)是本項檢測試驗中采用與待撿物(樣品、人用試劑就是人的血清等)具有同源性和同質(zhì)性,又不含有待檢物質(zhì),并能客觀比較和鑒別處理因素(血清免疫學(xué)試驗中有特異性抗原與抗體反應(yīng))之間的差異。

  3.陽性對照(品):

  (1)陽性對照(品)的概念與要求:同陰性對照(品),只是采用“精選"的含有待檢物質(zhì)的人血清制備而成。所謂“精選",就是把收集的陽性人血清經(jīng)過數(shù)種試驗進行“篩試"、把含有“干擾性物質(zhì)"的血清剔除、不用,以避免出現(xiàn)“假陽性"干擾試驗結(jié)果。

  (2)陽性對照(品)設(shè)置,也可區(qū)分為兩種類型與用途:

  一是陽性對照主要用于評價該項試驗結(jié)果是否有效和試驗結(jié)果的穩(wěn)定性與可比性。而所設(shè)的陽性對照的測量值不列入Cut off值計算、但是不可不做。如HBsAg、抗—HBs、HBeAg等。

  二是陽性對照的設(shè)置,不僅用于評價試驗結(jié)果是否有效和試驗結(jié)果的穩(wěn)定性與可比性,而且計入Cut off的計算。此時的Cut off值的含義是代表該標(biāo)志物在健康(正常)人群中正常值范圍的上限。待檢樣本檢測值超過該上限(Cut off)時表示有診斷意義。

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